步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、，逐滴加入二--- (dmso)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0.  1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(dmsozui后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。

稳定阶段（从-110℃开始） 从比较大的安全性出发，拓纷程控速率冷冻仪在细管被取出之前，先将其冷却至-140℃。操作期间盖子管着的时候，拓纷程控速率冷冻仪里嵌入的微型开关---设备能及时并自动地把温度降低到需要的水平。一个新型冷冻循环，运行速度快一旦细管被卸载取出，重新加热和烘干程序就会被气动。由于的工作效率和---的加热组件（---2500w），20分钟之内拓纷程控速率冷冻仪就会准备---始一个新的制冷环节。