细胞冷冻保存，1. 材料：生长---之培养细胞、新鲜培养基、dmso (sigma d-2650)、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(gibcobrl15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->;-20 ℃30分钟--->;-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，胚胎冷冻仪价格，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
生物样本大都对温度极其敏感，尤其是细胞样本、制品。随着细胞的快速发展，细胞冷冻技术及效果变得重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率，大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害，如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果，是一个重要步骤。生物样品的成功冻存不仅取决于合适的冷冻保护剂，更取决于冷冻的速率、的温度控制和合理的温度梯度（40℃~80℃）。
免液氮程序降温仪的产品特性如下：冷却速率和温度的控制，重现性好使用方便简单，样品可原位成核可实现线性和非线性降温方案运转费用低：约为液氮冷冻仪的1%在麦管应用中，在循环末温度可恒定在-100 ℃，直到关闭冷冻仪不间断电源（ups）：电源失效时仍可完成温度循环。免液氮程序降温仪的应用领域有：冻存管、麦管、样品袋、微孔板和微孔板的样品低温贮存人类和动物胚胎、---研究用样品如淋巴细胞和组织细胞各种哺乳动物类细胞包括心肌细胞，动物脂肪，鸡肉和的冷冻储存典型冷冻袋中的脐带血衍生，微板盘中的黏连细胞和冷藏生物储藏和基因资料库应用。
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