程序降温仪的产品特点分别是:前部开门,方便样品的放入和取出,仪器自带至少6种常见程序,覆盖用户大部分用途; 至少20个自设定程序,可根据不同应用需求自行设定;冷冻曲线可显示样品温度和腔体温度,融化潜热等参数,进口程序降温仪批发价格,---整个操作过程备有证明文件,直观---;温度偏差< 2℃(降温过程中腔体内两点间温差);内置风扇(带防护网)提供水平层流循环风,均匀分散注入的液氮,---温度均一性。
细胞冷冻保存,1. 材料:生长---之培养细胞、新鲜培养基、dmso (sigma d-2650)、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(gibcobrl15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法:(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->;-20 ℃30分钟--->;-80 ℃ 16~18小时(或隔夜)--->;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量,亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1~-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃,进口程序降温仪价格,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,进口程序降温仪,逐滴加入二--- (dmso)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,进口程序降温仪器,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(dmsozui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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