程序降温仪的冷却速率被控制,冷却温度可达-100 ℃,控温---了整个冷冻剖面的准确性和重现性,---是在重要的成核/播种阶段,---了细胞冷冻后的恢复效果。crf-1操作简单,可与pc机相连,全自动程序降温仪,数据可以通过软件进行设定和记录,冷冻剖面直接显示,从下拉菜单中可以找到不同的冷却配置文件,也可编写定制冷却配置文件。
注意事项:1、选择合适的冻存架和样品温度探头;2、冻存管样品探头插入---至少为样品内二分之一,探头顶端不得接触管壁;3、血袋样品温度探头请压在血袋下方,且---片状光滑面(无探头线---来的一面)紧贴血袋;4、样品与模拟样品(放探头样品)放入冻存腔体时,必须是同一温度;5、必须在样品温度与腔体温度都静置到相同的步温度时,才能再次按run开始第二步的降温;
慢速降温保存通常采用“两步法”,即步先将生物样品采用某个较慢的降温速率降温到 -80℃并维持一段时间,然后第二步再将己经处于 -80℃状态的生物样品直接投入液氮罐里( -196℃)进行深低温的长期保存。慢速降温法的实质是使用较慢的降温速率,使得降温过程中细胞内的水逐渐脱离细胞,以达到减少细胞内冰晶形成的概率的目的,从而提高细胞的存活率。他的优势是所用的冷冻保护剂浓度较低,只需要3%-20%左右,但容易造成冷损伤和渗透压失衡。
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