6、潜---应该出现在缓慢降温的第二步结束进入快速拉大温差的第三步前期；7、如潜---位置出现时刻不对，可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点，进口程序降温仪，形成新的优化程序，并进行新样品验证；8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准，有时即使曲线少有异常，但只要复苏效果好，可不关注；9、降温完成后快速转移样品至液氮罐，让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中---升温幅度过大（近距离转移，或放冻存容器中转移）。
步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、，逐滴加入二--- (dmso)至20%浓度，进口自动化程序降温仪，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(dmsozui后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
稳定阶段（从-110℃开始） 从比较大的安全性出发，进口程序降温仪批发，拓纷程控速率冷冻仪在细管被取出之前，先将其冷却至-140℃。操作期间盖子管着的时候，拓纷程控速率冷冻仪里嵌入的微型开关---设备能及时并自动地把温度降低到需要的水平。一个新型冷冻循环，运行速度快一旦细管被卸载取出，重新加热和烘干程序就会被气动。由于的工作效率和---的加热组件（---2500w），20分钟之内拓纷程控速率冷冻仪就会准备---始一个新的制冷环节。
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