6、潜---应该出现在缓慢降温的第二步结束进入快速拉大温差的第三步前期；7、如潜---位置出现时刻不对，可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点，形成新的优化程序，并进行新样品验证；8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准，有时即使曲线少有异常，但只要复苏效果好，可不关注；9、降温完成后快速转移样品至液氮罐，让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中---升温幅度过大（近距离转移，或放冻存容器中转移）。
细胞冷冻保存，程序降温仪品牌，1. 材料：生长---之培养细胞、新鲜培养基、dmso (sigma d-2650)、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(gibcobrl15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->;-20 ℃30分钟--->;-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，全自动程序降温仪，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，合肥程序降温仪，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
低温为什么可以进行生物样品的保存？主要是因为：水份是生物样品里的主要成份，而在深低温，即温度低于-８0℃，水存在晶体状态和玻璃态２种物理方式。而从热力学角度分析，自动化程序降温仪，水的这２种状态的水分子都具有---的粘度，并且几乎不会扩展。水的这个在深低温下几乎不会扩散的特性为生物样品的低温保存提供了可能。深低温状态下水存在的晶体状态和玻璃态２种状态，低温保存也同样分为慢速降温和快速降温（玻璃化）２种方式。
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