步骤：(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，进口细胞程序降温仪，加入培养基、，进口自动化程序降温仪，逐滴加入二--- (dmso)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞，用加的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(dmsozui后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示完全之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
免液氮程序降温仪，北京进口程序降温仪，与传统的用于ivf实验室、以液氮为基础的可控速率冷冻设备不同，crf-1因为不需要液氮作为制冷媒介，具有无交叉污染风险和可以用于洁净空间以及隔离设施的特点。其整洁和安静的台式设计及其性能上的冷冻后细胞---能力，优于或与标准的液氮冷却器相当。由于不用液氮、也不使用酒精，进口程序降温仪器，所以没有潜在的火灾风险，也省去液氮储藏罐占用空间的烦恼。
本仪器由以下三部分构成:1，上位机控制系统: 自带，冷冻时只要运行有关软件即可。2.标准冷冻箱: 内外全不锈刚结构.冷冻容机不小于200*200*200毫米.可同时容纳冷冻管160个或血袋8个.可定制不同容积以及立式卧式选择。。3.液氮罐及液氮加压器: 液氮加压器安装在30立升的液氮罐上，使罐内自增压，调节阀保持压力稳定。运行显示仪器实时工作状态﹑同时显示温度数据和曲线。
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